Az első bejegyzésemben röviden összegeztem, hogy mivel is
foglalkozom a PhD munkám során. Most szeretnék pontosabb képet adni az Aspergillus nemzetségről (szó szerint J
)
Először is ezen a sematikus ábrán látható az Aspergillusokra jellemző konídiumszerkezet.
Az Aspergillus fajok
elkülönítésére különböző módszerek léteznek, de pusztán morfológiai karakterek
alapján a pontos meghatározásuk csak néhány faj esetén lehetséges. Molekuláris
módszerekkel a fajok meghatározása biztosabb.
Ehhez először is néhány szóban
bemutatnám a polimeráz láncreakciót (PCR), amely ma a legelterjedtebb módszer a
fajok azonosításában. A PCR lényege, hogy egy fajspecifikus DNS szakaszt a
megfelelő körülmények és indítószekvenciák (primer) segítségével nagy
mennyiségben fel lehet szaporítani. Az Aspergillus fajok
esetén a β-tubulin vagy kalmodulin gének szekvenciái megfelelőnek bizonyultak a
fajszintű elkülönítéshez.
Mindez számunkra azért nagyon
fontos, mert az indiai szemklinikáról érkezett mintákat előzetes morfológiai
jellemzők alapján már megpróbálták azonosítani. Az izolátumok molekuláris
azonosítását viszont mi végezzük el. A korábban A. flavus-ként érkezett 52 izolátumból
a kalmodulin gén egy szakaszának amplifikálása és szekvencia analízise révén elvégezett
fajazonosítást eredményeként a legtöbb azonosított izolátum az A. flavus fajba tartozott, míg három az A. tamarii és egy az A. pseudotamarii fajba volt sorolható.
Ismételten érkezett előzetes
morfológiai azonosítást követően 25
A . flavus-ként, valamint 5-5 A . tamarii-ként, A. terreus-ként és A. fumigatus-ként
azonosított izolátum. Ezen izolátumok molekuláris azonosítását fogom a
közeljövőben elvégezeni. Ennek lépéseit a következő blogbejegyzésben fogom
részletezni.